miRNA質粒載體
MicroRNA（miRNA）是一類真核生物內源性的小分子單鏈RNA，通常長為18~25nt，能夠通過與靶mRNA特異性的堿基配對結合，引起靶序列降解或抑制其翻譯，從而對基因進行轉錄后的表達調控。
MicroRNA 表達載體構建
MicroRNA（miRNA）是一類真核生物內源性的小分子單鏈RNA，通常長為18~25nt，能夠通過與靶mRNA特異性的堿基配對結合，引起靶序列降解或抑制其翻譯，從而對基因進行轉錄后的表達調控（如右圖所示）。SYNTHBIO MicroRNA載體利用CMV啟動子可以在眾多哺乳動物細胞中快速、高效、持續(xù)表達pre-miRNA，經過Drosha（RNaseⅢ）作用形成small hairpin pre-miRNAs（約70nt），再過Dicer作用形成成熟的microRNA（約22nt），作用靶mRNA，起到表達調控作用。
microRNA過表達載體
SYNTHBIO提供兩種過表達的方式：
1. 從天然的基因組序列中表達pre-miRNA轉錄本構建pre-microRNA。插入序列不僅包含pre-miRNA莖環(huán)結構，同時構建100-200bp長的上下游兩端的側翼序列。使用使用pol-Ⅱ（如CMV）啟動子，這種構建方式保證高水平的表達pre-microRNA。表達出來的pre-miRNA的生理活動盡可能接近天然狀態(tài)。
使用這種構建方式，客戶只需提供miRNA的具體信息及指定過表達載體類型（如SYNTHBIOpEX系列 M核過表達載體?，我們完成序列合成，質粒構建。
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目錄號
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產品名稱
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規(guī)格
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價格
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交貨期限
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HSC09001
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質粒型microRNA 過表達載體-1
(pre-miRNA+flanking sequences, ~500bp)
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50μg
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￥2,500
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3-4周
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2. 利用SYNTHBIO優(yōu)化過的載體，模擬內源miRNA-155的表達模塊，這種構建方法解決了不同miRNA表達效率差異的問題，同時也有效的避免了有些內源miRNA表達時產生-3p，-5p的問題。miRNA的發(fā)夾序列融合在EGFP報告基因的后面，模擬miRNA在體內的成熟過程。
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SYNTHBIO microRNA載體元件信息及用途
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特征
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用途
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CMV promoter
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高表達目的基因
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EmGFP
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利用熒光顯微鏡觀察轉染效果
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Blasticidin resistance gene
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可用來篩選穩(wěn)定細胞系
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Spectinomycin
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篩選含有已經轉化質粒的E. coli
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pUC origin
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質粒可以在E. coli中進行高拷貝
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使用這種構建方式，客戶只需提供miRNA的具體信息，我們完成序列合成，質粒構建。
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目錄號
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產品名稱
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規(guī)格
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價格
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交貨期限
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HSC09002
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質粒型microRNA 過表達載體-2
(pGCMV/EGFP/miR/Blasticidin)
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50μg
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￥1,000
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2-3周
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備注：保證插入序列正確，不保證miRNA的過表達效率，不保證轉染效率。所有實驗僅供科研使用。
microRNA抑制子表達載體
SYNTHBIO提供兩種miRNA抑制子載體構建的方式：
1. ;)PAN>利用SYNTHBIO優(yōu)化過的載體，模擬內源miRNA-155的表達模塊，來表達miRNA inhibitor序列。這種構建與SYNTHBIO miRNA過表達方式2使用同樣的載體系統(tǒng)，方便客戶使用同一套系統(tǒng)完成miRNA的過表達與抑制。
使用這種構建方式，客戶只需提供miRNA的具體信息，我們完成序列合成，質粒構建。
miRNA sponge的特點：
a. 由于miR Sponges是由質粒編碼的，它能夠通過真核表達載體達到穩(wěn)定沉默細胞microRNA的目的；
b. 能夠沉默整個家族的microRNA以達到對整個家族microRNA功能的研究；
c. 可以利用miR Sponges實現(xiàn)體內外loss of function研究；
d. 可以用來檢測luciferase靶基因報告系統(tǒng)分析；
e. 可以自由組合串聯(lián)不同miRNA抑制子序列，達到沉默多種不同miRNA的目的。
使用這種構建方式，客戶需提供miRNA的具體信息、預構建miRNA inhibitor的重復數(shù)及預構建inhibitor的序列信息，我們完成序列合成，質粒構建。
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目錄號
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產品名稱
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規(guī)格
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價格
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交貨期限
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HSC09004
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質粒型microRNA 抑制子載體-2
(microRNA inhibitor sponge, 3重復)
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50μg
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￥1,500
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3周
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microRNA靶基因熒光素酶報告載體
SYNTHBIO采用Promega的psicheck2.0的載體系統(tǒng)完成靶基因3’ UTR質粒載體構建服務。可提供基于人、小鼠、大鼠基因的UTR構建。
psicheck2.0報告基因檢測系統(tǒng)用來檢測siRNA/miRNA與靶基因是否可能存在調控作用，該報告系統(tǒng)報告熒光(hRluc)，其下游構建了靶基因3’UTR區(qū)域，通過對該熒光的監(jiān)測，即可驗證siRNA/miRNA對該靶標是否有調控作用；另有一校正熒光(hluc) 作為穩(wěn)定內參，用于監(jiān)測質粒表達效率。
嚴格的實驗體系，要求miRNA與mRNA 3’ UTR驗證實驗中需要構建靶mRNA的點突變載體，以驗證靶點作用有效性。突變載體構建主要依據預測的miRNA與靶基因3’UTR的穩(wěn)定結合區(qū)域(即種子區(qū))。通過種子區(qū)全部堿基或部分堿基突變導致miRNA與靶基因3’UTR區(qū)域的結合能力大大降低，從而判斷是否存在miRNA的調控作用。
完成miRNA靶基因報告基因載體構建，需要客戶提供：miRNA具體信息，預測靶基因信息，miRNA與靶mRNA結合位點信息。
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目錄號
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產品名稱
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規(guī)格
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價格
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交貨期限
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HSC08005
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雙熒光素酶報告實驗載體構建(≤500bp)a
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50μg
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￥2,500
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3-4周
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HSC08006
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雙熒光素酶報告實驗突變載體構建（種子區(qū)突變）b
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50μg
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￥2,500
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3-4周
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注：
a. 靶基因3’ UTR長度須小于500bp，否則價格及合成周期另計；
b. 單位點(即1個miRNA-mRNA作用位點) 突變價格如上，多位點突變價格及合成周期另計。
Lentivirus microRNA表達載體
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目錄號
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產品名稱
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規(guī)格
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價格
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交貨期限
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HSC06001
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慢病毒干擾載體 LV-1 (pGLVU6/GFP)
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50μg
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詢價
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2周
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HSC06002
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慢病毒干擾載體 LV-2 (pGLVU6/Puro)
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50μg
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2周
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HSC06003
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慢病毒干擾載體 LV-3 (pGLVH1/GFP+Puro)
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50μg
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詢價
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2周
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HSC06004
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慢病毒干擾載體 LV-9 (pGLVU6/RFP)
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50μg
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詢價
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2周
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SYNTHBIO microRNA 過表達載體庫
SYNTHBIO公司已經利用自己的miRNA載體骨架成功構建為數(shù)眾多的miRNA的過表達載體，載體庫中的miRNA expression vectors 1周之內即可出貨，價格更優(yōu)。
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目錄號
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產品名稱
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規(guī)格
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價格
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交貨期限
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HSC09003
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質粒型microRNA 抑制子載體-1
(pGCMV/EGFP/miR/Blasticidin)
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50μg
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￥1,000
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2-3周
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2. miRNA sponge（海綿）載體構建：SYNTHBIO通過構建載體，表達包含多個成熟miRNA結合位點的RNA序列，通過吸附結合成熟miRNA，從而抑制miRNA的作用，從而進行功能缺失性研究。
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公司位于合肥市高新區(qū)安徽中科資城創(chuàng)業(yè)孵化器A區(qū)，擁有2000平方米獨立研發(fā)中心以及無菌實驗室，四條完善的多肽生產線，配備了Waters LC- MS/MS、Waters UPLC、Waters 全自動純化儀、島津LCMS、全自動凍干系統(tǒng)、紫外分光光度計等專用精密儀器保障合肥星肽生物科技有限公司月產3000條精品多肽的生產能力，這些得以讓我們可以為客戶快速準確的提供各種高質量的多肽產品及服務。
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